淡水石斑鱼在鱼缸中怎么养(海带多糖对斜带石斑鱼生长性能及胃肠道消化酶活性的影响)

斜带石斑鱼，鲈形目鲈亚目鳍科石斑鱼属，我国主要分布于台湾、广东和海南沿海，常栖息于大陆沿岸和大岛屿沿岸，但在河口和离岸百米深的水域中也可发现。因其生长快、肉质细嫩且味道鲜美而受到人们的青睐，是我国重要的海水养殖种类。

近年来，对斜带石斑鱼多方面的研究取得了较大的成果，但研究的重点大多在温度和盐度等对斜带石斑鱼的生长性能、体成分和消化酶的影响，以及人工繁殖及苗种培育的工作上，对于多糖应用于斜带石斑鱼的研究较少，其研究大多集中在中草药对鱼的影响上，但有关藻类多糖对于斜带石斑鱼的研究尚未见报道，基于此，研究在自制软颗粒料时添加不同含量的海带多糖，研究其对斜带石斑鱼胃肠道蛋白酶活性及肠道二糖酶活性的影响，探讨其适宜的添加量及应用的可行性，为开辟藻类多糖在海水养殖鱼类饲料中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验鱼饲养管理

试验鱼为福建厦门小嶝水产养殖场人工培育的斜带石斑鱼幼鱼，平均体质量为 (90 ± 2. 6)g，体长为 (15 ±2. 25)cm。石斑鱼鱼苗运到福建省淡水水产研究所养殖试验场地，放入暂养水桶中驯养 2周，用10 mg/kg 的土霉素溶液消毒，选取体格健壮且大小规格基本一致的个体，随机放入8 个 150 L 的水族箱中，每组 2缸，每缸 15 尾鱼，每缸配备一台小循环过滤器来净化水体，称量初始体质量后开始试验。

每天早上 08:00 ～08:30 和下午 17:00 ～17:30定时投喂，每次达到表观饱食后停止投喂。每天检测水质情况，清洗小循环过滤器，每周清洗水缸，并用土霉素消毒。试验用水为一级过滤海水，避光饲养，用增氧机昼夜持续增氧，每次投喂 1 h 后吸出粪便，每天傍晚换水约 1/3 ～1/2，以保持水质清新。试验期间，水温 24 ～30 ℃，pH (8. 0 ±0. 3)，溶氧质量浓度 ＞ 7. 0 mg/L，氨氮质量浓度 ＜ 0. 2 mg/L。试验期 48 d。

1.2 试验期日粮的配制

在粉料中分别添加 0、0. 5%、1. 0% 和 1. 5% 海带粗多糖 ，饲料配方见表 1，分别设为对照组 (CK 组)、0. 5% 组(F1 组)、1. 0% 组 (F2 组) 和 1. 5% 组 (F3 组)。各组饲料原料混匀后制成 4 mm 粒径的软颗粒料，之后分装入自封袋，置于 4 ℃冰箱冷藏备用，软颗粒料每3 d 制作一次，3 d 剩下的饲料弃去，用新料投喂。

1.3 样品采集

试验结束后，禁食 24 h，每缸鱼整体称质量后，随机取 10 尾鱼，用 50 mg/L 丁香酚进行麻醉处理，待鱼侧翻后，称质量测体长，将鱼解剖，分离出胃肠道 (内脏和肝均称质量并记录)，用预冷 4 ℃氯化钠注射液冲洗和滤纸吸干水分，置于 －40 ℃冰箱保存，用于粗酶液的制备。

1.4 生长性能分析

每桶鱼称质量测体长并采样后，分别按以下公式计算增重率(WGＲ)、饲料系数 (FCＲ)、内脏比、肝体比 (HSI)、鱼体丰满度 (CF) 和存活率(SＲ)。

FCＲ = 总投饵量/总增质量

尾绝对增质量/g = 试验结束尾均质量 － 试验开始尾均质量

WGＲ/% =(尾绝对增质量/试验开始尾质量) ×100日增质量/g = 尾相对增质量/试验天数

CF = 体质量 ×100/(体长)

内脏比/% = (内脏质量/鱼体质量) ×100

HSI/% = (肝质量/鱼体质量) ×100

SＲ/% =(试验结束鱼尾数/试验开始鱼尾数) ×100

1.5 粗酶液的制备和酶活力的测定

取出样品，分离出胃肠组织，分别剪取前、中和后 3 个肠段，称每个肠段质量，加入 10 倍体积(V/W) 的预冷氯化钠注射液 (4 ℃)，并在冰水浴中匀浆 10 min。匀浆液用高速冷冻离心机进行离心(4 ℃、1 万 r/min、10 min)，取上清液 (即消化酶粗提液) 低温保存待检。

胃肠蛋白酶活性测定参考 QB/T 1803—93。吸光值用 UV －8100 型分光光度计。

肠道二糖酶活性测定均采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒，按说明书操作，吸光值用UV －8100 型分光光度计。

1.6 数据处理

试验数据用 Excel 和 SPSS 19. 0 软件进行数据分析和统计。对数据做单因素方差分析 (One － wayANOVE)，结果以平均数 ± 标准差表示，其中日采食量、日增质量和 WGＲ 等用均值表示。

2 结果与分析

2.1 海带多糖对斜带石斑鱼生长性能的影响

从表 2 可见: 与 CK 组相比，试验组末均质量和 WGＲ 均有所提高，其中 F1 和 F2 组末均质量分别比 CK 组高 17. 5% 和 13. 0%，差异显著 (P ＜0. 05)，WGＲ 分别比 CK 组高 19. 25% 和 16. 6%，差异显著 (P ＜0. 05)。与 CK 组相比，试验组末体长均无显著差异 (P ＞ 0. 05)。添加量为 0. 5% 时，日采食量、CF 和内脏比均显著提高 (P ＜ 0. 05)，另外 2 组虽有提高，但差异不显著 (P ＞0. 05); F1组 FCＲ 与 CK 组相比极显著降低 (P ＜ 0. 01)，F2组显著降低 (P ＜ 0. 05)，F3 组 FCＲ 虽有降低，但差异均不显著 (P ＞0. 05)。

2.2 海带多糖对胃肠道蛋白酶活力的影响

从表 3 可见: 随着海带粗多糖添加量的增加，胃肠道部位的蛋白酶活力呈现降低的趋势。F1 和F2 组的胃蛋白酶活力显著高于 CK 组 (P ＜ 0. 05)，F3 组比 CK 组高，但差异不显著 (P ＞ 0. 05); F1

与 F3 组相比，差异显著 (P ＜ 0. 05)。F1 和 F2 组肠蛋白酶活力显著高于 CK 组 (P ＜0. 05)，组间呈降低趋势，但差异不显著 (P ＞0. 05)。

2.3 海带多糖对斜带石斑鱼各肠段二糖酶活性的影响

2.3.1 海带多糖对斜带石斑鱼各肠段麦芽糖的影响

从表 4 可见: 与 CK 组相比，各个海带粗多糖添加组斜带石斑鱼的各个肠段的麦芽糖酶活性均有一定程度的增加，其中，F1 组前肠、中肠和后肠的麦芽糖酶活性均极显著高于 CK 组 (P ＜0. 01); F2组各个肠段的麦芽糖酶活性均显著高于 CK 组 (P ＜0. 05); F3 组各个肠段的麦芽糖酶活性均高于 CK组，但差异不显著 (P ＞0. 05)

2.3.2 海带多糖对斜带石斑鱼各肠段乳糖的影响

从表 4 可见: F1 和 F2 组中肠和后肠段的乳糖酶活性与 CK 组相比有显著提升 (P ＜0. 05)，前肠与 CK 组相比，其乳糖酶活性均高于 CK 组，但差异不显著 (P ＞ 0. 05); F3 组各肠段的乳糖酶活性均高于 CK 组，但差异也都不显著 (P ＞0. 05)。与海带粗多糖对斜带石斑鱼麦芽糖酶活性的影响相比，其影响相对小一些。

2.3.3 海带多糖对斜带石斑鱼各肠段蔗糖的影响

从表 4 可见: 与 CK 组相比，海带粗多糖各组斜带石斑鱼蔗糖酶活性均有一定水平的提高，添加量为 1. 0%时，其前肠和中肠蔗糖酶活性显著高于CK 组 (P ＜ 0. 05)，除此外，其余海带粗多糖各组各肠段的蔗糖酶活性虽高于 CK 组，但差异均不显著 (P ＞0. 05)。由此可见，海带多糖虽在一定程度上能提高斜带石斑鱼各肠段的蔗糖酶活性，但与麦芽糖酶和乳糖酶相比，其影响较小，可以判断，在试验中，海带粗多糖对斜带石斑鱼蔗糖酶活性的影响大体不显著 (P ＞0. 05)。

3 讨论

试验中选用海洋天然活性多糖作为斜带石斑鱼的饲料添加剂，结果表明，海带多糖具有促进斜带石斑鱼生长、提高饲料营养物质的利用率和降低FCＲ 等作用，与国内外的研究结果一致: 在饲料中添加 300 mg/kg 的海带多糖发现，断奶仔猪的 WGＲ 极显著的提高了（P ＜0. 01); 向枭等在齐口裂腹鱼的日粮中添加黄芪多糖发现，齐口裂腹鱼的生长状况和 FCＲ 得到明显改善; 刘洪丽等在奥尼罗非鱼的日粮中添加马尾藻多糖发现，0. 1% 的添加量能极显著提高奥尼罗非鱼的增长率和生长速度，极显著降低 FCＲ (P ＜0. 01)。试验中，与 CK 组相比，F1 和 F2 组均显著提高了斜带石斑鱼日增质量和降低 FCＲ ( P ＜0. 05)，说明海带多糖作为鱼饲料添加剂可有效提高斜带石斑鱼的生长性能。

多糖对于动物消化酶活性的影响，国内外也有一定报道。其作用机制可能为生物活性多糖具有免疫调节作用，能极大提高动物机体免疫活力，极大发挥动物体生长潜能，进而提高机体消化酶活性，促进动物生长。斜带石斑鱼属肉食鱼种，对蛋白质具有很强的消化能力，消化主要发生在幽门盲囊、胃和肠 (消化活力幽门盲囊 ＞ 胃 ＞ 肠)，于肠道黏膜二糖酶活性的研究，鲜有报道，但对蛋白酶和淀粉酶研究较深入。试验结果表明，海带多糖能显著提高斜带石斑鱼胃肠道蛋白酶活力和肠黏膜麦芽糖酶活力 (P ＜ 0. 05)，但于乳糖和蔗糖酶影响较弱，这可能与淀粉酶活性有关。淀粉酶能催化淀粉分解成葡糖糖和麦芽糖等，淀粉酶活力提高，进而促使麦芽糖生成量增加，正反馈提高麦芽糖的活性。陈勇等研究发现，0. 25% 的壳聚糖能显著提高异育银鲫的蛋白酶和淀粉酶活性 (P ＜0. 05)。试验中，海带多糖可能具有提高淀粉酶活性的作用，进而提高麦芽糖酶活性，但尚需深入的研究考证。

4 结论

海带多糖作为一种来源广泛且作用丰富的天然活性物质已广为人知。试验结果表明，海带多糖具有促进斜带石斑鱼生长，提高饲料利用率等效用，但其功效不是随着多糖添加量增加而更明显，相反，添加量越高，其作用反而会降低，试验中，多糖添加量以 0. 5%为最适添加量。