植物细胞有细胞膜吗(你造么？植物也可分泌细胞外囊泡（外泌体）)

新年新气象，奉上全新植物研究思路！

一提到外泌体，各位看客首先想到的应该是医学领域研究的液体活检，有木有？其实早在20世纪六十年代，植物中有细胞外囊泡（EV）的研究就已被报道

(突感自己有点out)

但还没有研究者对植物EV的内含物进行分析，限于当时的技术水平植物外泌体的研究没有得到深入的开展，因而它们的功能也尚不清楚。近期有研究报道称，植物在应答病原体感染时（免疫互作研究的福利），细胞外囊泡对于植物早期防御机制的构建起着重要的作用。

目前对于外泌体的研究，尤其是外泌体RNA的研究主要还是集中在哺乳动物，包括人、鼠、猪、羊等的细胞上清液和体液样本的研究，作为植物界研究大咖的你是不是有一种无力感？（植物领域相关研究者表示对动物界研究火爆的外泌体好陌生）讲了这么多到底啥是外泌体？植物咋研究滴？别急，继续看~

1、基本概念

细胞外囊泡：简称EV，是由细胞释放的各种具有膜结构的囊泡结构统称，这些囊泡的直径可以从30、40nm到8、9um。

（小编悄悄告诉你:1um=1000nm)

该概念是由国际细胞外囊泡学会（ISEV）创造的术语，根据细胞外囊泡的生物合成或释放途径可以对囊泡进行分类：

1）外泌体（exosomes）：直径为30-150nm，起源于内吞途径，其密度约为1.11-1.19g mL-1；（此类型研究目前比较火热）

2）微粒/微囊泡（microparticles/microvesicles）：直接从质膜释放，直径约100-1000nm；

3）凋亡小体（apoptotic body/bleb）：直径约为50nm-2μm，由细胞凋亡产生；

4）其他各种EV亚群。

对于外泌体RNA的研究相较于普通植物组织样本的研究，在方法上首要区别在于前者需要对外泌体进行富集，具体的富集方法在此不再赘述，对于植物外泌体的富集方法比较感兴趣的可以@小编，随时为您奉上。

2、细胞外囊泡检测

对于富集得到的细胞外囊泡都需要进一步的检测，以确定其具体的分类属性。目前对于外泌体的鉴定主要有四种方法：透射电子显微镜（TEM）、Nanosight、Western Blot、流式细胞术。每种方法都有各自的优缺点，关注的重点也不太一样，建议多种方法结合，感兴趣的可以查下资料，很多的啦！

3、植物细胞外泌体的研究应用

目前植物外泌体的研究相较动物领域的研究比较有限，现有文章的研究主要集中在对于病原菌的抵抗防御作用；外泌体作为船对于分泌蛋白的促分泌及运输作用；植物细胞来源的外泌体将siRNA运输至真菌细胞中，沉默靶向转录本，发挥作用等，大部分偏蛋白质的研究，2017年有两篇比较经典的案例简单整理如下：

1）2017年美国印第安纳大学的Brian D. Rutter在国际著名杂志 Plant Physiology 发表了一篇名为“Extracellular vesicles isolated from the leaf apoplast carry stress-response proteins ”的研究成果，作者首先介绍了从拟南芥叶片质外体液提取EV的方法，然后对EV进行蛋白质组分析，结果发现富集了生物和非生物胁迫应答的相关蛋白。相应地，被丁香假单胞菌感染的植物、水杨酸处理后的植物的EV分泌增强。这项发现表明EV可能是植物免疫应答的一个重要成员。

Figure . Plant EVs are enriched for stress-respons

2）阿根廷马德普拉塔国立大学的研究人员研究了向日葵的EV，并测试了它们是否可以与真菌细胞相互作用。从幼苗的细胞外液中分离EV，并通过透射电子显微镜和蛋白质组学分析进行表征。这些纳米囊泡似乎富含细胞壁重塑酶和防御蛋白。研究人员制备了膜标记的EV，并验证了它们被植物病原真菌核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）吸收。功能测试进一步评估了EV影响真菌生长的能力。用植物EV处理的孢子表现出生长抑制、形态变化和细胞死亡。该研究介绍了植物EV存在的确凿证据，研究人员展示了它们与真菌细胞相互作用和杀灭真菌细胞的能力。这些结果介绍了植物中通过EV进行细胞间通讯的概念。

Figure . Uptake of extracellular vesicles (EV) by S. sclerotiorum spores

总结

目前对于植物EVs的研究比较有限，且主要集中在国外，若您对外泌体RNA的研究比较感兴趣（比如外泌体RNA测序），又想发现些新的东西，新的研究思路是否已经产生？话不多说，思路这个东东，有时只可意会不可言传，你get到了么？若是您对这方面的内容感兴趣可以留言，小编随时恭候您的咨询！