检测方法有哪些(你知道丁型肝炎病毒的检测方法有哪些吗？有哪些不足的地方？)

Posted 2023-05-30

篇首语：人非生而知之，孰能无惑？惑而不从师，其为惑也，终不解矣。本文由小常识网(cha138.com)小编为大家整理，主要介绍了检测方法有哪些(你知道丁型肝炎病毒的检测方法有哪些吗？有哪些不足的地方？)相关的知识，希望对你有一定的参考价值。

检测方法有哪些(你知道丁型肝炎病毒的检测方法有哪些吗？有哪些不足的地方？)

目前可以通过检测HDV抗原（HDV-Ag）、HDV抗体（HDV-Ab）和HDV RNA来诊断HDV感染。

肝脏活检时，HDV-Ag可通过免疫荧光和免疫组织化学法等方法检测，但是目前的应用比较少；ELISA方法检测HDV抗体是实验室常用的检测手段，IgM被认为是HDV感染中具有代表性的标志物之一，而且其清除效率与疾病的疗效紧密相关；IgG会在HDV感染后持续存在。HDV RNA 是当前诊断HDV感染的“金标准”，HDV RNA的定量测定可用于监测抗病毒治疗的应答，RT-PCR方法对HDV RNA是实验室常用的检测手段。

01丁型肝炎病毒检测方法不足的是什么？

ELISA方法检测HDV抗体时受到许多因素的影响：

①急性HDV感染时，HDV抗体存在时间很短很难检出，所以HDV抗体阴性不能否定丁型肝炎的发生；而慢性HDV感染时，血液中的HDV抗体和抗原形成免疫复合物，会对检测结果造成影响。

②HDV IgG与肝细胞受损和炎症活动密切相关，因此联合血清HDV RNA的检测结果才能确HDV抗体的阳性结果。

尽管RT-PCR检测具有快速、方便、特异等优点。但是HDV RNA中GC含量和互补性高，给HDV扩增带来了巨大的技术挑战，而且HDV的高度遗传变异性也使得需要精心设计其引物和探针。

由于HDV RNA的广泛遗传变异性，迄今为止尚无完全标准化的PCR检测技术。

02如何改进丁型肝炎病毒的检测方法？

丁肝的检测主要包括抗原检测，抗体的检测和病毒核酸的检测三个方面：

1、ELISA方法检测HDV病毒抗原：存在窗口期短，灵敏度特异度较差的缺点。

2、HDV病毒抗体的检测包括IgG型和IgM型。

ELISA试剂盒通常使用间接法检测抗HDV-IgG，但是容易出现假阳性结果，不同厂家的试剂盒质量参差不齐，通常用于临床HDV感染的初步筛查。ELISA检测抗HDV-IgM通常使用捕获法，抗HDV-IgM反映了患者体内HDV感染的情况，也可以用来指导HDV抗病毒治疗。但是目前检测试剂盒的准确性仍然需要进一步提高。

3、HDV RNA检测是诊断丁肝感染的"金标准”。

目前RT-PCR检测灵敏度可以达到103拷贝/微升，巢式PCR 检测下限可以达到10拷贝/微升。但是由于HDV基因组高度可变性，给引物的设计带来了巨大的挑战。目前尚无统一的标准，不同实验室的结果也不具有可比性。

03丁型肝炎病毒检测方法有什么新进展？

针对于HDV的检测分别从抗体、核酸两个方面对检测方法进行了探索与改进：

1、抗体检测：目前ELISA试剂盒普遍使用酶催化底物的显色反应，存在灵敏度不高，特异性不强的缺点。对HDV抗原重新表达和纯化，将其固定于固相载体，并且进一步与纳米酶显色技术相结合，进一步提高检测的灵敏性和稳定性。

2、核酸检测：首先，基于微滴数字PCR技术，建立了可以绝对定量HDV患者体内HDV RNA水平的ddPCR技术检测方法，检测下限可低至单个拷贝。

其次，我们使用最新的CRISPR/Cas13a检测技术建立了对HDV RNA进行精准、快速的检测方法，检测下限分别低至10拷贝/微升和100拷贝/微升。

相信经过努力将来研究成果可以投入HDV的临床应用检测，更有利于HDV感染的早期筛查，为更多的临床医生和患者提供帮助。