明场和荧光的区别(如何选择一台适合自己的显微镜——光学部件的选择（上）)

Posted 2023-05-28

篇首语：我要做的绝不止此。我不是寻求者。我要为自己创造一个属于自己的太阳！本文由小常识网(cha138.com)小编为大家整理，主要介绍了明场和荧光的区别(如何选择一台适合自己的显微镜——光学部件的选择（上）)相关的知识，希望对你有一定的参考价值。

上一篇给各位小伙伴们介绍了显微镜的种类，包括正置/倒置、宽场显微镜、超高分辨率显微镜、激光共焦显微镜等等，不知道大家有没有认真听讲。今天给大家带来的是显微镜光学部件的介绍。

◇ 首先通过一个简图来看一下今天要讲的部分内容：

◇ 接下来从光源、聚光镜一一为大家介绍。

显微镜不同种类的光源

在评价显微镜光源优缺点前先介绍光源照明的两个重要指标参数：

1、显色性

● 光源的显色性，就是灯泡让物体呈现『真实颜色』的能力，通常用Ra表示。光源的显色性越好，光谱连续性就越接近太阳光，颜色还原越好。

2、色温

● 黑体从绝对零度（－273℃）开始加温后所呈现的不同颜色。计量单位为“K”（开尔文）。因为背景颜色影响观察样本的色彩还原度，所以不同的色温适用的观察对象不同。

早期的显微镜依靠油灯或自然光等外部光源，虽然显色性好，但可控性差。现代显微镜通常使用可以被控制的整体光源，主要有卤素灯、汞灯、氙灯、LED灯等，那么我们在购买显微镜时该如何选择光源，他们的区别是什么？

1、卤素灯光源

● 卤素灯光谱和日光接近，显色性好，色温颜色偏暖黄。在观察某些物质时需借助色温转换片。卤素灯泡的寿命较短，一般使用1000小时亮度就会降低到原先的一半左右。

2、高压汞灯

● 高压汞灯光源(UHP，UMPRD,UHE，SHP等)工作时，电流激发高压汞蒸汽发光。色温偏冷白，在观察某些物质时需借助色温转换片，光强度高，适于荧光、若荧光观察，使用时需要预冷预热，寿命短在200小时左右，更换成本高。

3、高压氙灯

● 光谱和日光接近，并且亮度高。寿命比较长，是比较好的光源之一。但危险系数高，易爆炸，使用时要注意其强紫外的伤害性。

4、新型LED光源

● LED光源体积小，亮度高，光强连续可调。使用寿命长，有效时间可达到50000小时以上；不需要预热，即开即用，响应时间快；节能环保不存在对人体和环境污染的风险；显色性好，适合明场及荧光成像，是优选光源。ECHO正倒置一体显微镜采用的新型LED光源。

二、聚光镜的选择及调节

聚光镜又名聚光器，通常装在显微镜载物台的下方。聚光镜功能是用来弥补光亮的不足并适当改变光的性质，将光线聚焦于被检物上，得到最佳的照明效果。按级别可分为：长工作距离聚光镜、高分辨率聚光镜和多功能聚光镜。

1、长工作距离聚光镜

● 工作距离长，NA值较低，适用于低倍物镜。并适合观察培养皿等较厚的物体。

2、高分辨率聚光镜

● 工作距离短，NA值较高，适用于高倍物镜。适合观察切片等较薄的物体。

3、多功能聚光镜

● 可以进行相差、暗场、偏光、微分干涉等观察方式。根据观察需要进行选择。

聚光镜的调节：

聚光镜孔径光阑（即：光圈）开的大小与物镜上标识的数值孔径有对应关系。应开到物镜数值孔径的75%-85%。每一支物镜都有类似这个的标识，例如：10X/0.25、40X/0.65，这其中的0.25 以及0.65即为物镜的数值孔径，聚光镜的光阑调节要遵照这些去调节。