提RNA逆转录PCR(最新版新冠病毒肺炎诊疗方案中，CT值越高，代表什么？)

Posted 2023-05-27

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提RNA逆转录PCR(最新版新冠病毒肺炎诊疗方案中，CT值越高，代表什么？)

3月15日，国家卫健委发布《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）》。不少人注意到，几点变化中，除了轻症病人不需要入院治疗之外，“CT值”这个专业名词几次出现。那么，究竟什么是“CT值”？这个数值的大小意味着什么？数值越低越安全？为此，解放日报·上观新闻记者专门采访上海市免疫学研究所副所长、中国细胞生物学会科普工作委员会主任委员李斌，来为大家答疑解惑。

《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）》调整了解除隔离管理、出院标准以及解除隔离管理、出院后注意事项。文中提到，国内有关研究显示，处于恢复期的感染者在核酸CT值≥35时，样本中未能分离出病毒，密切接触者未发现被感染的情况。据此，新版诊疗方案将解除隔离管理及出院标准中的“连续两次呼吸道标本核酸检测阴性（采样时间至少间隔24小时）”修改为“连续两次新型冠状病毒核酸检测N基因和ORF基因CT值均≥35（荧光定量PCR方法，界限值为40，采样时间至少间隔24小时），或连续两次新型冠状病毒核酸检测阴性（荧光定量PCR方法，界限值低于35，采样时间至少间隔24小时）”。

短短几句文字中，多次出现CT值。究竟什么是CT值？这还要从目前新冠病毒的主要筛查方式说起。上海市免疫学研究所副所长李斌介绍，目前的新冠病毒核酸检测绝大多数都是采用荧光定量PCR方法，对病毒RNA运用逆转录后PCR的方式扩增目的序列进行检测。

所谓荧光定量PCR技术，是在PCR反应体系中加入荧光报告系统，利用荧光信号的变化对PCR过程进行实时监控，实现对起始模板的定量检测。因为有扩增的过程，所以核酸检测方法通常准确性很高。

这一检测方法是1996年由美国Applied Biosystems公司推出的一种新定量试验技术，它通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。

核酸CT值是什么意思呢？CT值，C代表Cycle,T代表Threshold，又称循环阈值，是阈值线与扩增曲线的交点对应在X轴上的值，是循环数。CT值的含义是每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。李斌解释，核酸检测的方法是将病毒的基因指数扩增，一个变两个、两个变四个、四个变八个，2的10次方是1024，2的20次方是100万，2的30次方10亿，2的40次方是1万亿，CT值=40，表示该病毒样本基因放大2的40次方，即经历40回合的几何级数放大后，侦测到荧光值可达到阈值。

CT值代表人体内的病毒含量的多少。简单地说，就是在做核算检测时，检测仪器需要把病毒样本基因放大到一定程度才能侦测到病毒。病毒核酸浓度越高，荧光强度越高，循环阈值CT越小。也就是说，CT值越小，说明循环次数越少，用的时间越短，不用放大多少倍就能检测到病毒。这代表病毒浓度越高，越容易被侦查到。反之，如果CT值越高，代表需要越多时间与循环，病毒需要放大很多倍才能被侦测到，CT值越高代表病毒含量较少。

翻阅《新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南（第二版）》发现，关于结果判断一项，写道：阴性：无CT值或CT值>40。阳性：CT值<37，可报告为阳性。可疑：CT值在37-40之间，建议重复实验，若CT值<40，扩增曲线有明显起峰，该样本判断为阳性，否则为阴性。

李斌表示，CT值受到样本、实验室环境以及仪器等各种条件的影响，因此CT值并不是恒定不变的，即使相同情况对标本进行二次检测，CT值也不会完全一致。

栏目主编：黄海华文字编辑：李蕾题图来源：朱瓅摄影

来源：作者：李蕾