微生物的灭菌方法有哪些(花卉组织培养中微生物污染的途径组培瓶如何消毒外植体消毒详解)

Posted 2023-05-26

篇首语：行动是治愈恐惧的良药，而犹豫拖延将不断滋养恐惧。本文由小常识网(cha138.com)小编为大家整理，主要介绍了微生物的灭菌方法有哪些(花卉组织培养中微生物污染的途径组培瓶如何消毒外植体消毒详解)相关的知识，希望对你有一定的参考价值。

微生物的灭菌方法有哪些(花卉组织培养中微生物污染的途径组培瓶如何消毒外植体消毒详解)

花卉组织培养微生物污染

微生物污染是花卉组织培养中普遍存在的问题。在花卉通过组织培养的快速繁殖过程中,培养基、接种器具、超净工作台、接种室等工作环境消毒不严格或无菌操作不规范等均可导致组织培养污染的发生。

花卉组培中如何消毒

另外,对于某些花卉本身生长于温暖多雨的环境,茎叶的表面及其组织内部均滋生有大量的表生及内生微生物,一些侵入表皮内薄壁组织的菌丝体以及部分内生微生物,不能被一般的表面消毒处理所清除,而随着组织材料进入培养过程,引起组培污染而导致组培失败。

花卉组培微生物污染途径有哪些

花卉组织培养微生物污染途径

1、若污染菌类是零星分散在培养基中，则可确定是人为引起的污染：

比如培养基灭菌不彻底；超净工作台长时间不换滤网，致使净化能力降低；接种用具灭菌不彻底；操作不正确，动作生硬缓慢，开瓶时间太久，接种台摆放物品杂乱，操作中心在人体范围之内；接种室环境长期不灭菌，菌类太多等。

2、若污染菌类是从材料周围长起，则可证明是花卉材料带菌引起：

可能是接种用具灭菌不彻底，接种时材料被污染；或者是未及时发现污染苗，接种过程交叉感染等。

3、若菌类从材料培养基以上部分长起，而不是从培养基先长起：

且发生在5天以后，则说明是材料带的内生菌。若从培养基以下开始长菌，发生时间较早，且有从里向外的趋势，则说明是切口引起的污染，原因可能是灭完菌后，未剪去两个切口或虽剪但器具带菌。

上述都严重影响了花卉组织培养的商业化生产。因此,研究花卉组培微生物污染的来源、种类及消毒方法与消毒剂的筛选,对降低污染微生物造成的危害,提高组织培养的成功率和培养物的成活率,降低生产成本,提高经济效益等均具有重要意义

解决方案

用传统的消毒方式如抗生素、次氯酸钠、硝酸银、氯化汞等对花卉进行处理，这几种方式有的杀菌不彻底，有的对人体有害，有的引起盐害，有的还会影响花卉材料的正常生长分化。

因此，寻找一款高效优质的消毒剂及配合专业的技术解决方案。才是花卉组培行业长期发展的方向。通过长期的应用实践证明，德国进口的奥克泰士杀菌消毒剂（食品级），配合我们独有的消毒方案和专业的技术人员，彻底解决花卉组培过程中的微生物污染问题。

奥克泰士

Oxytech/奥克泰士来自德国，是多组分生态消毒杀菌剂，协同微动作用，过氧化氢与银结合形成强大的消毒杀菌与抑菌剂。（Shuval et al 1995, Batterman et al 2000, Pedahzur et al 2000）奥克泰士消毒剂能够杀灭革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、细菌（包括细菌芽孢）、病毒、酵母菌、真菌和原生动物。奥克泰士消毒剂的作用经过270多项测试和验证（由国际知名检测机构、实验室和大学进行）。奥克泰士产品经过VAH（德国应用卫生协会）验证并注册。

自引进中国市场以来，取得了良好效果，解决了植物组培过程中微生物难以控制的难题，取得了巨大的经济效益和社会效益，使奥克泰士应用技术得到推广普及。

奥克泰士产品特点

1、奥克泰士用于花卉组织培养中花卉的微生物污染防治与清除，能广泛抑制和清除细菌和真菌的污染，并防止真菌孢子的萌发；

2、在合理的使用剂量下，奥克泰士是一种非常有效的花卉组培杀菌剂与保护剂，不会对花卉的生长（如种子萌发，愈伤增殖、再生等）产生任何影响，可视为培养基标准配方成份；

3、奥克泰士主要用于预防和消除来自空气、水源或者人体接触等外界因素导致的花卉组培过程中的微生物污染，同时，对于花卉内生菌也同样具有非常好的抑制效果；

4、没有毒性和残留，奥克泰士中的过氧化氢作用后完全分解成水和氧气，没有毒副产物。极其微量的银离子属于亲生物体金属，对人和植物均是有益成分，在生物体中也不会有蓄积。

5、奥克泰士具有稳定性，无需过滤灭菌，能直接加入培养基高温灭菌而不会影响使用效果，使用更加方便；

6、奥克泰士性价比更高，可更加广泛的应用于更多的科学研究、作物育种、组培苗工厂化生产中。

7、国内常用检测：

杀菌效力检测（高效，高抗性枯草杆菌黑色变种芽孢ATCC9372的杀灭率>99.999%）；
无菌检测；
经口毒性检测（实际无毒）；
红细胞微核检测（无致癌无致畸、无致微核作用）；
铅砷汞重金属含量检测（零检出）；
金属腐蚀性检测（基本无腐蚀）。

更多检测数据请咨询奥克泰士技术工程

8、欧盟和德国相关认证和检测：

DIN EN ISO 9001;
DIN EN ISO 14001;
IFS国际食品标准认证；
欧盟EMAS生态认证；
欧盟A.I.S.E.认证。

一、接种室环境空间消毒

⚫ 稀释比例：10%（1份D-50/500型，9份水）；

⚫ 剂量：10ml/m3；

⚫ 方法：将稀释后的消毒液，用喷雾设备均匀喷洒到接种室内，每1立方米空间喷洒10毫升消毒液。例如20平方米，高2.5米房间，其空间大小为50立方米，应喷洒50×10=500 毫升消毒液。

**备注：每间隔1个月应使用此比例进行彻底灭菌。日常维护性消毒（每周一次）按照1:32

比例稀释使用。

二、操作台面、工具、器皿消毒

⚫ 稀释比例：3%（1份D-50/500型，32份水）；

⚫ 剂量：50-100ml/m2；

⚫ 方法：将稀释后的消毒液，对操作台面等进行喷洒、擦拭或涂抹。小型器具可直接浸泡在消毒液中，时间15分钟。奥克泰士无毒无残留，消毒后无需再次冲洗。

三、外植体消毒

将植物组织修整清洁完毕后，用2%的D-50/500型浸泡5-10分钟，然后用无菌水冲洗2-3次。

⚫ 稀释比例：2%（1份D-50/500型，49份水）；

⚫ 不同种类种植和部位对药剂耐受程度不同，在操作时要根据材料的大小、幼嫩、质地等差异做出判断后，再选择适宜的浓度和消毒时间。消毒的最佳效果应以最大限度地杀死材料上的微生物，而又对材料的损伤最小为好，如不确定可先少量做测试验证。

四、植株生长过程中杀菌

生长过程中如发现染菌，用0.1%-0.15%稀释的D-50/500型直接喷洒到植株上，可以杀灭病原微生物，防控病害。

微生物的灭菌方法有哪些(花卉组织培养中微生物污染的途径 组培瓶如何消毒 外植体消毒详解)

微生物的灭菌方法有哪些(花卉组织培养中微生物污染的途径 组培瓶如何消毒 外植体消毒详解)

一、接种室环境空间消毒

二、操作台面、工具、器皿消毒

三、外植体消毒

四、植株生长过程中杀菌

微生物的灭菌方法有哪些(花卉组织培养中微生物污染的途径组培瓶如何消毒外植体消毒详解)

微生物的灭菌方法有哪些(花卉组织培养中微生物污染的途径组培瓶如何消毒外植体消毒详解)