影响液相色谱保留时间的因素(干货高效液相色谱仪的四大特点和局限性)

Posted 2023-05-26

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影响液相色谱保留时间的因素(干货高效液相色谱仪的四大特点和局限性)

高效液相色谱仪是一种常用的分析方法一样，但不可能十全十美，作为使用者在掌握了高效液相色谱仪的特点，使用范围和局限性的前提下，充分利用高效液相色谱仪的特点，就可在解决实际分析任务中发挥重要的作用。

一、高效液相色谱仪的应用范围

高效液相色谱仪适于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定易分解的、分子量大、不同极性的有机化合物；生物活性物质和多种天然产物；合成的和天然的高分子化合物等。它们涉及石油化工产品、食品、合成药物、生物化工产品及环境污染物等，约占全部有机化合物的 80%。其余 20%的有机化合物，包括永久性气体，易挥发低沸点及中等分子量的化合物，只能用气相色谱仪进行分析。

二、高效液相色谱仪的四大特点

1、分离效能高：由于新型高效微粒固定相填料的使用，液相色谱填充柱的注销可达 5×10 3 ～3×10 4 块/m 理论塔板数，远远高于气相色谱填充柱 10 3 块/m 理论塔板数的柱效。

2、选择性高：由于液相色谱柱具有高柱，并且流动相可以控制和改善分离过程的选择性。因此，高效液相色谱仪不仅可以分析不同类型的有机化合物及其同分异构体，还可以分析在性质上极为相似的旋光异构体，并已在高疗效的合成药物和升华药物的生产控制分析中发挥了重要作用。

3、检测灵敏度高：在高效液相色谱仪中使用的检测器大多数都具有较高的灵敏度。如被广泛使用的紫外吸收检测器，最小检出量可达 10 9 g，用于痕量分析的荧光检测器，最小检出量可达 10 -12 g。

4、分析速度快：:由于高压输液泵的使用，相对于经典液相色谱，其分析时间大大缩短，当输液压力增加时，流动相流速会加快，完成一个样品的分析时间仅需几分钟到几十分钟。

三、高效液相色谱仪方法的局限性

高效液相色谱仪虽具有应用范围广的优点，但也有下述局限性。

1、在高效液相色谱仪中，使用多种溶剂作为流动相，当进行分析时所需成本高于气相色谱仪。且易引起环境污染、当进行梯度洗脱操作时，它比气相色谱仪的程序升温操作复杂。

2、高效液相色谱仪中缺少如气相色谱仪中使用的通用型检测器（如热导检测器和氢火焰离子化检测器）。近年来蒸发激光散射检测器的应用日益增多，有望发展成为高效液相色谱仪的一种通用型检测器。

3、高效液相色谱仪不能替代气相色谱仪，去完成要求柱效高达 10 万块理论塔板数以上，必需用毛细管气相色谱仪分析组成复杂的具有多种沸程的石油产品。

4、高效液相色谱仪也不能代替中、低压柱色谱法，在 200kPa 至 1MPa 柱压下去分析受压易分解、变性的具有生物活性的生化样品。