影响样本含量变化的因素(公共卫生大家谈|核酸检测假阳性和假阴性受到什么因素干扰?)

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影响样本含量变化的因素(公共卫生大家谈|核酸检测假阳性和假阴性受到什么因素干扰?)

图说:昨晚,《公共卫生大家谈》第三期节目开播 来源/采访对象提供(下同)

新冠病毒长什么样?我们平时所运用的检测手段有什么区别?为什么会测出来假阳性或者假阴性?昨晚,《公共卫生大家谈》第三期节目开播,上海市临床检验中心副主任居漪带您深挖细掘新冠病毒检测方法,为常态化防疫筑起健康防线。

居漪说,新冠病毒是β属的冠状病毒,它有一个包膜,呈圆形或者椭圆形,它的直径大概在60到140纳米,在电镜下面看到病毒的形状像皇冠,所以叫它冠状病毒。在检验人员的眼中,关注它主要的五个必须基因,分别针对了四个蛋白以及一个RNA的聚合酶。

在本市实施常态化疫情防控工作的措施方案里,有一个至关重要且必不可少的环节,那就是“检测”。新冠病毒的检测手段根据不同的检测对象和技术方法,可分为三类:实验室检查、病原学检查和血清学检查。核酸检测和抗原检测就属于病原性检查,此外还有血清学检查中的抗体检测大家可能也有所耳闻。其中,核酸检测的特异性和灵敏度高,目前它是诊断新冠病毒感染的“金标准”。而抗原检测的灵敏度虽不如核酸检测,其结果也无法用于确诊,不过优势在于随时随地方便快捷自查风险可能。抗体检测则可以知晓我们是否感染过新冠病毒,仅用作对新冠病毒核酸检测阴性疑似病例的补充检测指标或疑似病例诊断中与核酸检测协同使用,不能作为新冠病毒感染确诊和排除的依据。

图说:新冠病毒的检测手段可分为三类

谈及新冠病毒检测结果的准确性,曾有部分市民发声质疑:“为何我被告知核酸检测结果是假阳(假阴)?”那么有哪些因素可能会干扰核酸检测结果呢?居漪说,假阳性可能是样本在运输、处理过程中发生交叉污染;实验环境有气溶胶污染;实验过程中使用的耗材、设备等受污染所致。假阴性可能是不合理的样本采集、转运、储存及处理、样本中病原体含量过低;病原体待测靶序列的变异或其他原因导致的序列改变;未经验证的其他干扰可能。

上海市民对核酸检测和抗原检测已经非常熟悉,但并不了解核酸检测究竟是什么技术。其实,这个技术叫RT-PCR,中文可以叫逆转录-聚合酶链式反应,新冠病毒的检测要求比较高,要求生物二级的实验室来进行检测。先把采到的人上皮细胞当中的核酸提出来,进行一个逆转录,通过体外扩增,加入荧光标记探针,然后就可以收集这个荧光信号,最后把它判读出来得到是阴性还是阳性。居漪说,新冠病毒变异毒株突变主要集中在S基因上,而PCR检测靶标选取的都是新冠病毒保守基因片段,如ORF1ab基因、N基因等,并不会影响核酸检测结果。

为何要高频次进行核酸、抗原检测?这是由于新冠病毒奥密克戎变异株特点是“隐匿性强、传播速度快、传播力强”,且全人群易感。在疫情管控难、风险点位不明确的情况下,“抗原筛查+核酸确诊”这套组合拳,可以尽快发现病毒踪迹,更快更准阻断传播链。若不慎将抗原检测提取液碰到皮肤或眼睛,会有危害吗?对此,居漪说,抗原保存液的主要成分为低离子强度的缓冲液、表面活性剂和防腐剂。缓冲液和表面活性剂都是安全的,碰到皮肤完全不用担心会有害。若不慎入眼还是建议及时用干净的水进行冲洗。

图说:抗原检测提取液若不慎入眼应及时用水冲洗

不同的检测手段所呈现的结果也是大家非常关心的,比如说新的接触隔离的管理、出院标准,大家都听到一个Ct值要大于等于35,代表的是什么呢?居漪说,Ct值是专业名词,主要讲的是在扩增实验当中,它所产生的荧光信号,大于或者达到我们预先设定的荧光信号所扩增的循环数。怎么理解呢?比如说我们在样品当中病毒载量是比较低的,要经过好几轮的扩增,才能达到我们设定的阈值,这样的Ct值比较大,反过来也是同样,如果病毒载量浓度比较高的,Ct值相对比较小。Ct值是一个判断的值,是有标准的。根据国家标准,如果是要判断成阳性,大部分的试剂都是Ct值要小于40,可以判成阳性,但是各家的试剂还会有些不一样。

对于我们老百姓,Ct值35和40又什么区别?居漪说,其实35是根据国家最新第九版的诊疗指南当中有一个解除隔离的标准,如果Ct值是大于等于35值的时候就可以认为传染性没有了。但还是要提醒工作人员以及广大市民,初诊或者刚刚感染的人群,还是要严格按照试剂说明书的CT值判断。

如今,本市进入全面复工复产的阶段,市民对于核酸检测的需求仍然会持续存在,居漪说,上海已经布局了一万多个核酸检测点,大量的核酸检测工作对于检测的准确性提出更高的要求。

临床检验中心其实早在3月份就培训了1.3万人,拿到了PCR的上岗证,还会对将近250家的相关实验室进行督导,包括每日的蹲点督导、月度的特别检查,每家实验室必须要做到非常准确才能通过,否则就要进行整改。

新民晚报记者左妍

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