张家港偏光显微镜(2020-2022年“实验动物模型兔”高被引文章 Top 15)

Posted 2023-05-25

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张家港偏光显微镜(2020-2022年“实验动物模型兔”高被引文章 Top 15)

编者按：建立真实模拟人类疾病和与组织工程研究相关的动物模型，对探索研究组织工程相关的疾病发生、发展机理、发现药物新靶点以及临床前药效学评价等生物医学研究，具有十分重要的理论价值和临床借鉴意义。

下面我们就来看看，大家都关注哪些“实验动物模型兔”文章。

2020-2022年CJTER杂志“实验动物模型兔”高被引文章 TOP 15

胶质细胞源性神经营养因子/PI3K/AKT通路参与电针促进面神经压榨损伤模型兔的面神经再生

单位：西南医科大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科

来源：中国组织工程研究,2020,24(07):1094-1100.

摘要

背景: 多穴位电针治疗周围性面瘫的机制不明。胶质细胞源性神经营养因子(glialcell-derivedneurotrophic factor, GDNF)是促进体外运动神经元存活的最有效因子,PI3K/AKT信号通路在保护受损神经元方面发挥着重要作用。目前暂没有GDNF/PI3K/AKT通路参与电针促进兔周围面神经再生的研究。

目的: 观察电针对周围面神经压榨损伤后再生的影响, 并从GDNF/PI3K/AKT介导的信号通路角度探讨电针对面神经元的保护机制。

方法: 成年健康新西兰大白兔由西南医科大学动物实验中心提供,随机分成正常组和模型组。模型组制备右侧面神经颊支压榨性损伤的病理模型,造模成功后随机分为模型对照组和电针组,模型对照组自然康复,电针组取右侧翳风、颊车、四白、地仓、阳白、颧髎穴位进行电针治疗,1次/d,每次30 min。观察动物面瘫症状的改善情况并进行评分;正常组直接取材,模型组分别于术后1,4,7,14,28 d取含面神经元的脑桥组织,进行苏木精-伊红染色观察神经元形态,尼氏染色观察尼氏小体,免疫组化测定GDNF的阳性表达, Western blotting检测3组各时间点面神经元组织中GDNF、PI3K、AKT、P-AKT的蛋白表达。实验方案经西南医科大学动物伦理学委员会批准,批准号为20170120001。

结果与结论: ①与模型对照组相比,电针组动物的面瘫症状(患侧口角歪斜下垂,触须倒伏且运动减弱,眼睑上抬不能)恢复较快且完全;②电针组面神经元形态学改变、尼氏体变化均较模型对照组病理变化轻;③术后各时间点,面神经元GDNF免疫反应较强,阳性细胞数多于模型对照组(除术后1 d,其余各时间点P < 0.001),且面神经元组织中GDNF、PI3K和P-AKT蛋白表达明显增高(P < 0.05/0.01/0.001)。提示:电针可有效治疗由压榨面神经颊支引起的周围性面瘫,促进面神经元形态恢复,其面神经元保护机制可能与上调GDNF在面神经元中的表达,激活PI3K/AKT信号通路有关

关键词：中医学; 电针; 穴; 胶质细胞源性神经营养因子; 蛋白激酶B; AKT; 运动神经元; 面神经麻痹; 神经再生; 信号转导

被引 14 下载 345

富血小板血浆联合髓芯减压调控激素性股骨头坏死模型兔氧化应激反应

单位：青海大学附属医院创伤骨科

来源：中国组织工程研究,2020,24(11):1677-1682.

摘要

背景: 氧化应激在股骨头坏死损伤中发挥重要作用,富血小板血浆富含生长因子,可以加快骨折愈合,配合髓芯减压术能促进非创伤性股骨头坏死的恢复。

目的: 探讨富血小板血浆联合髓芯减压术能否通过Keap1/Nrf2/HO-1信号通路抑制兔激素性股骨头坏死模型氧化应激反应。

方法: 将40只实验新西兰兔随机分为正常组、模型组、对照组和富血小板血浆组,每组10只。除正常组外其他3组兔在无菌环境下建立激素性股骨头坏死模型,术后4周向富血小板血浆组动物股骨头内髓芯减压后注射植入0.4 mL 3%的富血小板血浆,对照组兔只进行髓芯减压术治疗,对照组与模型组兔正常饲养。14周后苏木精-伊红染色观察各组兔股骨头骨髓腔内病理学变化和骨陷窝空缺率,检测各组兔血清中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、还原型谷胱甘肽及丙二醛等氧化应激指标活性,TUNEL检测股骨头组织内骨细胞凋亡情况,免疫荧光检测股骨头组织内Keap1、Nrf2分布,WesternBlot检测股骨头组织内Keap1、Nrf2、HO-1蛋白表达。实验方案经青海大学附属医院动物实验伦理委员会批准(批准号为qhdx-201908374)。

结果与结论: ①与正常组相比,模型组骨组织内骨小梁变细,结构紊乱;对照组较模型组有所改善,骨小梁结构得到恢复,空骨陷窝减少(P < 0.05),富血小板血浆组经富血小板血浆联合髓芯减压治疗较对照组得到进一步改善,骨小梁结构更加完善,空骨陷窝进一步减少(P < 0.05),与正常组无显著差异(P > 0.05);②模型组血清中总抗氧化能力、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和还原型谷胱甘肽的含量均显著低于正常组(P < 0.05),而丙二醛浓度显著高于正常组(P < 0.05);对照组以上指标稍有改善,但与模型组比较差异不显著(P > 0.05);富血小板血浆以上氧化应激指标较模型组和对照组明显改善(P < 0.05);③模型组股骨头组织内Keap1蛋白表达显著低于正常组(P < 0.05),Nrf2、HO-1蛋白表达显著高于正常组(P < 0.05);富血小板血浆组股骨头组织内Keap1的表达较模型组和对照组低(P < 0.05),Nrf2、HO-1的表达显著高于模型组和对照组(P < 0.05);④结果提示,富血小板血浆能有效抑制兔激素性股骨头坏死过程中氧化应激反应,该作用可能是通过激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路活性而发生的。

关键词：富血小板血浆; 股骨头坏死; 氧化应激; Keap1/Nrf2/HO-1信号通路

被引 13 下载 353

富血小板血浆干预膝关节骨性关节炎模型兔关节软骨和滑膜的改变

单位：重庆市第九人民医院创伤中心(骨科病区)

来源：中国组织工程研究,2020,24(14):2205-2210.

摘要

背景: 研究显示富血小板血浆具有很强的促进软骨细胞修复和增生作用。

目的:探讨富血小板血浆在骨性关节炎中对软骨细胞修复及滑膜炎症抑制的疗效。

方法: 新西兰大白兔40只,于兔耳中央动脉取血后采用Hokugo等的方法制备富血小板血浆,同时检测外周血及富血小板血浆的血小板、血小板衍生生长因子、转化生长因子β和血管内皮生长因子水平。采用前交叉韧带切断法来制作动物模型后随机将兔分为实验组和对照组,实验组双侧膝关节每周注射1次0.3 mL富血小板血浆;对照组每周注射1次0.3 mL无菌生理盐水,共注射10周。注射后第2,4,6,8,10周对兔进行大体观察及膝关节组织学观察;检测关节软骨Ⅱ型胶原蛋白及基质金属蛋白酶13水平,并进行软骨组织Mankin评分。实验方案经重庆医科大学动物实验伦理委员会批准。

结果与结论: ①富血小板血浆中血小板、血小板衍生生长因子、转化生长因子β和血管内皮生长因子水平分别是正常血中的5.5,4.8,7.7和6.2倍(均P < 0.05);②注射后第6周实验组Mankin评分小于对照组(P < 0.05);③实验组第4,6,8,10周时Ⅱ型胶原蛋白水平明显高于对照组(P < 0.05);实验组第2,4,6,8,10周时基质金属蛋白酶13水平明显小于对照组(P < 0.05);④结果表明,关节腔内注射富血小板血浆能通过缓解关节滑膜炎症及延缓甚至阻断软骨细胞的损伤来抑制骨性关节炎的进展。

关键词：生物材料; 软骨生物材料; 组织工程; 软骨缺损; 软骨细胞; 修复; 富血小板血浆; 骨性关节炎

被引 11 下载 311

经筋手法干预膝骨关节炎模型兔骨骼肌收缩力学的改变

单位：广州中医药大学第三附属医院

来源：中国组织工程研究,2021,25(02):201-204.

摘要

背景: 团队前期研究发现,足阳明经筋及足太阳经筋在膝骨关节炎的发病中起重要的作用,二者循行对应的是腘绳肌及股四头肌。在经筋辨证指导下以手法治疗膝骨关节炎取得较好疗效,但其作用机制尚不明确。

目的: 观察经筋手法对兔膝骨关节炎骨骼肌收缩力学改变的影响。

方法: 12只新西兰兔随机分为经筋手法组、常规手法组和对照组,每组4只,均以Videman右后膝伸直位固定制动法构建右膝关节炎模型。经筋手法组及常规手法组分别在造模后第2天接受经筋手法及常规手法治疗,3次/周,治疗2周;对照组造模成功后正常饲养。治疗结束后1周对各组兔大腿股四头肌及腘绳肌进行收缩力学实验测试。实验经广州中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号:20190221018)

结果与结论: ①在治疗2周后2个手法组股四头肌及腘绳肌的单收缩幅度、强直收缩幅度、弹性模量优于对照组(P < 0.05)。经筋手法组的单收缩幅度、强直收缩幅度优于常规手法组(P < 0.05);②结果说明,经筋手法可以有效改善兔膝关节炎模型骨骼肌的收缩力学指标,从而改善临床症状,延缓疾病的进展。

关键词：经筋手法; 骨关节炎; 骨骼肌; 力学; 动物; 模型

被引 10 下载 297

针刀松解联合丹参注射液关节腔注射治疗骨性关节炎模型兔

单位：1. 黑龙江中医药大学附属第二医院骨科 2. 黑龙江中医药管理局3. 哈尔滨市第四医院骨科

来源：中国组织工程研究,2020,24(02):209-214.

摘要

背景: 丹参注射液与针刀松解术都是临床中治疗骨关节炎很常用的技术,目前缺乏对2种治疗方法联合使用的研究。

目的: 对比单独使用针刀松解术、单独使用丹参注射液与两种方法联合使用治疗兔模型骨关节炎的效果。

方法: 实验方案经黑龙江中医药大学动物实验伦理委员会批准。50只新西兰白兔分为5组:空白对照组;模型组;丹参注射液组;针刀组;针刀联合丹参注射液组。除空白对照组外,其他4组兔均制备膝关节骨关节炎模型。造模成功后,对针刀组兔内外侧支持带、内外侧膝眼,膝关节上方髌上囊、股四头肌各肌肌腹,膝关节内侧股薄肌肌腹及止点、收肌肌群肌腹及止点和胫骨平台附近部位进行针刀松解;空白对照组及模型组兔关节腔注射生理盐水0.3 mL;丹参注射液组兔关节腔每次注射0.3 mL丹参注射液;针刀联合丹参注射液组:每周进行1次针刀治疗同针刀组,每次针刀干预之后,关节腔注0.3m L丹参注射液。上述干预每周1次,持续5周。对各组兔膝关节软骨进行大体观察及病理切片组织学观察,ELISA检测关节液白细胞介素1、肿瘤坏死因子α水平。

结果与结论: ①大体观察:模型组膝关节磨损较为严重,针刀组、丹参注射液组、针刀联合丹参注射液组膝关节轻度磨损;②病理切片评分:丹参注射液组评分略高于针刀组和针刀联合丹参注射液组差异无显著性意义;③ELISA检测结果:针刀联合丹参注射液组白细胞介素1、肿瘤坏死因子α水平显著低于或针刀组或丹参注射液组(P < 0.05);④结果说明,在兔膝关节骨关节炎模型中降低白细胞介素1、肿瘤坏死因子α水平方面,针刀松解术结合丹参注射液关节腔注射治优于单独使用针刀或单独使用丹参注射液关节腔注射。

关键词：膝骨关节病; 兔模型; 针刀闭合手术; 白细胞介素1; 肿瘤坏死因子; 丹参注射液; 关节腔注射

被引 9 下载 239

腰痹舒干预腰椎间盘退变模型兔髓核组织水通道蛋白1、水通道蛋白3的表达

单位：湖南省人民医院

来源：中国组织工程研究,2020,24(08):1168-1173.

摘要

背景: 椎间盘的老化和病变与椎间盘缺乏血液供应营养密切相关。水通道蛋白在椎间盘营养供应中发挥重要作用,但具体作用机制尚未完全明确。

目的: 基于水通道蛋白1、水通道蛋白3表达变化研究腰痹舒作用于兔椎间盘退变的机制。

方法: 取36只新西兰大白兔,将生理盐水注入L4/5、L5/6椎间盘制备腰椎间盘突出症模型,然后随机分成模型组、低剂量腰痹舒组、高剂量腰痹舒组,术后8周,模型组灌胃生理盐水5 mL/(kg•d),低剂量腰痹舒组灌胃腰痹舒5 mL/(kg•d),高剂量腰痹舒组灌胃腰痹舒10 mL/(kg•d),2次/d,共21 d。治疗后6周,取L4/5、L5/6椎间盘分别进行解剖大体观察、组织切片苏木精-伊红染色、RT-PCR、Western blot检测,观察3组髓核组织外观形态、病理形态以及水通道蛋白1、水通道蛋白3 m RNA和蛋白表达。

结果与结论: (1)各组均可见纤维环破坏,出现异常软骨组织,髓核减少,高剂量腰痹舒组病变程度轻于低剂量腰痹舒组,模型组破坏最明显;(2)治疗6周,高剂量腰痹舒组、低剂量腰痹舒组水通道蛋白1、水通道蛋白3 mRNA和蛋白表达量增高,与治疗前比较差异有显著性意义(P < 0.05);模型组治疗前后比较差异无显著性意义(P > 0.05);组间对比3组水通道蛋白1和水通道蛋白3 m RNA和蛋白表达,差异有显著性意义(P < 0.05);(3)结果表明,腰痹舒可能是通过提高水通道蛋白1、水通道蛋白3的表达量,减轻兔椎间盘退变。

关键词：腰痹舒; 腰椎间盘退变; 水通道蛋白; 水通道蛋白1; 水通道蛋白3

被引 6 下载 237

金骨莲灌胃对兔骨关节炎模型软骨细胞凋亡相关蛋白表达的影响

单位：1. 遂宁市中心医院关节外科 2. 遵义医学院附属医院骨一科

来源：中国组织工程研究,2020,24(08):1188-1194.

摘要

背景: 金骨莲胶囊为传统的苗药组方,其成分主要包含金铁锁、汉桃叶等成分,既往研究表明该药物具有软骨保护作用,但对其软骨保护的机制还不清楚。

目的: 探讨金骨莲灌胃治疗骨关节炎的可能机制。

方法: 从40只家兔中随机挑选10只作为空白对照组,余下的30只家兔以改良Hulth法在兔右侧后膝建立骨关节炎模型,并随机分为骨关节炎模型组(10只)、金骨莲灌胃组(10只),p38抑制剂组(10只)。建模7 d后,金骨莲灌胃组给予金骨莲与双蒸水混合液10 m L灌胃[57.5 mg/(kg•d)];p38抑制剂组给予兔右侧后膝关节腔注射10μmol/L p38抑制剂(SB203580)0.5 m L,每周1次;空白对照组及骨关节炎模型组仅灌服等量双蒸水,1次/d,干预8周后处死动物取右侧后膝关节股骨髁及胫骨平台。采用Pelletier评分评估软骨损伤情况;苏木精-伊红染色、番红O染色及Mankin评分评估软骨退变情况;Westernblot检测软骨组织中P-p38及Cleaved Caspase-3蛋白的表达;实时荧光定量PCR检测各组软骨组织中Bcl-2、Bax m RNA表达。

结果与结论: (1)金骨莲灌胃组Pelletier评分及Mankin评分较骨关节炎模型组及p38抑制剂组明显降低(P < 0.05);(2)金骨莲灌胃组软骨组织中Bax m RNA、Cleaved Caspase-3蛋白表达较骨关节炎模型组及p38抑制剂组明显降低(P < 0.05);(3)金骨莲灌胃组Bcl-2 m RNA的表达较骨关节炎模型组及p38抑制剂组均明显升高(P < 0.05);(4)金骨莲灌胃组软骨组织中P-p38蛋白表达较骨关节炎模型组与p38抑制剂组明显降低(P < 0.05);(5)结果表明,金骨莲可抑制骨关节炎模型兔软骨组织中凋亡相关蛋白和P-p38蛋白的表达,从而延缓关节软骨退变。

关键词：骨性关节炎; 软骨损伤; 金骨莲; 细胞凋亡; 丝裂原活化蛋白激酶

被引 6 下载 333

高分子绷带结合塑料杆建立的兔膝骨关节炎模型

单位：1. 新疆医科大学附属中医医院 2. 新疆医科大学

来源：中国组织工程研究,2020,24(23):3690-3695.

摘要

背景: 目前国内外有多种建立兔膝骨关节炎模型的方法,但大多模型建立中方法较为繁琐,原有的石膏制动方法存在部分缺陷。

目的: 探索采用高分子绷带结合塑料杆的方法建立兔膝骨关节炎模型。

方法: 选用雄性新西兰大白兔16只,随机分为模型组和对照组。模型组采用屈曲位高分子绷带固定制动的方法建立兔膝骨关节炎模型,对照组为正常组。模型组膝关节固定8周后去除高分子绷带,取2组兔滑膜、软骨及半月板进行苏木精-伊红染色组织病理学观察,并进行关节软骨Mankin评分。实验方案经新疆医科大学第一附属医院动物伦理委员会批准(批准号为IACUC-20170222026)。

结果与结论: ①光学显微镜下可见,模型组半月板软骨细胞及基质增多,部分软骨细胞体积增大,软骨陷窝清晰可见;滑膜组织少量慢性炎细胞浸润,胶原纤维增多,部分增粗伴玻璃样变性,部分滑膜组织呈绒毛-结节状增生;部分软骨面有轻微裂隙,软骨细胞及基质轻度增生,少部分软骨细胞及基质减少,胶原纤维排列紊乱。病理结果显示,具有典型的膝骨关节炎病理学改变;②模型组Mankin评分显著高于对照组(P < 0.05);③结果说明,采用高分子绷带结合塑料杆能成功建立兔膝骨关节炎模型,局部固定稳定性好,关节角度可控,并且定装置使膝关节完全暴露,局部透气性较好。

关键词：膝痹; 膝关节骨关节炎; 动物模型; 高分子绷带

被引 6 下载 203

电针脊髓损伤模型大鼠“足三里”与“伏兔”穴神经细胞凋亡因子Caspase-3的表达

单位：1. 柳州市中医医院 2. 广西中医药大学第一附属医院 3. 广西中医药大学附属瑞康医院

来源：中国组织工程研究,2020,24(32):5151-5157.

摘要

背景: 中医自《内经》开始就提出了"治痿独取阳明"之理论,但是有关电针干预足阳明胃经治疗脊髓损伤的报道相对较少。

目的: 探讨电针刺激"足三里""伏兔"穴对脊髓损伤大鼠受损节段Caspase-3表达的影响。

方法: 将64只SPF级SD雌性大鼠随机分为4组,即对照组、预标记组、损伤后标记组和电针干预组,每组16只。对照组及预标记在操作前给予Brdu(50 mg/kg)连续10 d腹腔注射标记细胞,对照组于第11天给予咬除椎板,并不损伤脊髓,预标记组第11天给予制作脊髓损伤模型;损伤后标记组及电针组在制作脊髓损伤后连续10 d腹腔注射Brdu标记细胞,其中损伤后标记组不给予干预措施,电针组造模后第3天开始针刺足三里、伏兔穴。各组分别于损伤后3,10,17,24 d取脊髓组织,运用苏木精-伊红染色观察神经元数量的变化;免疫组织化学染色观察Brdu阳性细胞表达;q RT-PCR技术检测Caspase-3mRNA的变化;Western blot检测Caspase-3蛋白表达的变化。实验方案经广西医科大学动物实验伦理委员会批准(批准号201712001)。

结果与结论: ①脊髓损伤以后Caspase-3的mRNA及蛋白表达均高于脊髓没有受到损伤的对照组,脊髓损伤后神经元的数量明显较对照组少;随着时间的推移,预标记组、损伤后标记组及电针干预组Caspase-3mRNA及蛋白表达先升高后降低,而电针组的Caspase-3表达明显减少,与预标记组及损伤后标记组比较差异有显著性意义(P < 0.05);②苏木精-伊红染色显示随着时间的推移电针组的神经元数量明显比未经干预的预标记组、损伤后标记组高,在第24天时逐渐接近对照组的神经元数量;③免疫组织化学结果显示电针组阳性蛋白表达呈先升高后降低的趋势,17 d升至最高,24 d降至最低,整体阳性蛋白表达高于其他组(P < 0.05);④结果说明,电针刺激"足三里""伏兔"穴可以减少Caspase-3 mRNA及蛋白表达,减少神经细胞的凋亡,同时可以促进神经元数量的增加,从而促进神经细胞的再生修复。

关键词：脊髓损伤; 电针刺激; 足三里; 伏兔; Caspase-3; 大鼠; 实验

被引 6 下载 413

建立兔胫骨VX2骨肿瘤模型的方法

单位：1. 承德医学院附属医院创伤骨科 2. 承德医学院附属医院急诊科

来源：中国组织工程研究,2020,24(23):3702-3707.

摘要

背景: 关于兔的VX2肿瘤模型方法有多种,但各方法的可靠性无人探究,课题组在原有方法上进行了改良,进行了此项研究。

目的: 探讨兔VX2肿瘤组织块、细胞悬液分别经改良法与传统植入法进行兔胫骨VX2骨肿瘤造模的可靠程度。

方法: 将健康成年新西兰大白兔40只随机分为2组,其中组织块组植入肿瘤组织块进行胫骨VX2肿瘤造模,细胞悬液组植入肿瘤细胞悬液进行胫骨VX2肿瘤造模,2组实验动物左侧胫骨均采用穿刺针植入,右侧胫骨均采用传统法植入。造模成功1h后对穿刺孔周围进行超声检查明确穿刺孔有无血肿,于第3周处死所有实验动物,进行双侧胫骨X射线检查明确肿瘤生长范围,取肿瘤及穿刺部位周围软组织进行大体及病理学检查对比肿瘤大小,并明确有无肿瘤细胞局部浸润。

结果与结论: ①组织块组有1只实验动物于术后死亡,脱组,细胞悬液组所有实验动物均存活;②X射线检查可见组织块组肿瘤均侵犯皮质层,细胞悬液组皮质层未侵及;肿瘤大体观察可见组织块组肿瘤侵犯骨皮质长度大于细胞悬液组;③组织块组改良法、传统法植入1h后分别有1例,7例穿刺孔周围血肿;细胞悬液组改良法、传统法植入1h后分别有2例,9例穿刺孔周围血肿;④组织块组改良法、传统法植入后3个月分别有1例,8例出现肿瘤局部浸润;细胞悬液组改良法、传统法植入后分别有2例,11例出现肿瘤局部浸润;⑤结果表明,组织块植入较细胞悬液植入制作兔VX2骨肿瘤更易培养出大的瘤体,从而使实验更易于观察,且组织块植入后肿瘤局部浸润率较细胞悬液法要低;同时采用改良法植入可有效降低造模过程中肿瘤细胞局部浸润率。

关键词：VX2肿瘤; 动物模型; 肿瘤组织块; 肿瘤细胞悬液; 新西兰大白兔

被引 5 下载 142

阳和汤对早期膝骨关节炎模型兔滑膜炎症的影响

单位：1. 福建中医药大学中医学院 2. 福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室

来源：中国组织工程研究,2022,26(05):694-699.

摘要

背景: 阳和汤是临床治疗膝骨关节炎的有效方药,前期基础研究表明阳和汤防治骨关节炎的机制与其对关节软骨的保护有关,阳和汤对膝骨关节炎早期滑膜炎症的影响尚未明确。

目的: 探讨阳和汤对早期膝骨关节炎模型兔滑膜炎症的影响,进一步明确阳和汤治疗早期骨关节炎的疗效及作用机制。

方法: 将24只4月龄新西兰兔随机分为空白对照组、模型组、阳和汤组和阳性对照组,每组6只。除空白对照组外,其余各组予关节腔注射木瓜蛋白酶造模。造模2周后,空白对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,阳和汤组给予6 g/(kg•d)阳和汤灌胃,阳性对照组给予24 mg/(kg•d)塞来昔布药物灌胃,连续给药2周。最后一次给药后4 h,测量膝关节局部皮温、关节周径,Lequesne评分评估膝关节功能;最后一次灌胃结束后第2天,ELISA法检测关节液中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、环氧化酶2、前列腺素E2水平;苏木精-伊红染色观察滑膜组织形态;免疫组织化学染色观察滑膜组织中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、环氧化酶2蛋白表达。

结果与结论: (1)与空白对照组比较,模型组膝关节周径增宽(P < 0.05),局部皮温、Lequesne评分及关节液中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、环氧化酶2、前列腺素E2水平均升高(P < 0.05),滑膜形态学炎性改变明显,滑膜组织中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、环氧化酶2蛋白表达均升高(P < 0.05);(2)与模型组比较,阳和汤组和阳性对照组膝关节周径减小(P < 0.05),局部皮温、Lequesne评分及关节液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、环氧化酶2、前列腺素E2水平均降低(P < 0.05),滑膜炎性改变减轻,滑膜组织中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、环氧化酶2蛋白表达均降低(P < 0.05);(3)结果表明,阳和汤能抑制早期膝骨关节炎模型兔关节液和滑膜组织中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、环氧化酶2、前列腺素E2的表达,减轻滑膜炎症,改善关节功能,从而延缓膝骨关节炎的进展。

关键词：阳和汤; 膝骨关节炎; 滑膜; 疼痛; 炎症; 机制; 新西兰兔

被引 4 下载 644

枸杞多糖干预膝骨关节炎模型兔关节软骨组织CD151和基质金属蛋白酶3的表达

单位：宁夏医科大学附属自治区人民医院手足与重建显微外科

来源：中国组织工程研究,2020,24(17):2648-2653.

摘要

背景: 有研究表明枸杞多糖具有抗老化、保护神经、抗疲劳、控制血糖、抗氧化及抗肿瘤等作用,其对于膝关节的骨性关节炎可能具有一定的保护作用,但目前还鲜有学者报道,CD151和基质金属蛋白酶3是评价膝关节骨性关节炎常用的因子。

目的: 观察枸杞多糖对CD151和基质金属蛋白酶3在兔骨性关节炎中表达的影响。

方法: 健康6月龄大耳白兔64只随机分等为4组:空白组、模型组、枸杞多糖组及生理盐水组。除了空白组外,其他3组均采用Hulth法复制膝骨关节炎模型兔,枸杞多糖组及生理盐水组以常规剂量枸杞多糖及生理盐水灌胃饲养4周。造模后12周取各组患侧关节软骨组织,应用苏木精-伊红染色观察各组关节软骨形态学变化,应用免疫组织化学染色及Western blot法观察CD151和基质金属蛋白酶3在各组关节软骨中的表达水平及空间分布。实验于2014年1月经宁夏人民医院动物伦理委员会批准(批准号:2014-30817)。

结果与结论: (1)免疫组织化学染色和Western blot检测显示,枸杞多糖组关节软骨组织中CD151和基质金属蛋白酶3吸光度值及蛋白表达均低于生理盐水组与模型组(P < 0.05);(2)上述结果证实,在骨性关节炎关节软骨组织中CD151和基质金属蛋白酶3表达增高,枸杞多糖可抑制骨性关节炎中CD151和基质金属蛋白酶3的高表达,从而减缓骨性关节炎的发生。

关键词：枸杞多糖; CD151; 基质金属蛋白酶3; 骨性关节炎; 兔; 膝关节; 免疫荧光染色; Western-blot法; 苏木精-伊红染色; 动物模型

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兔股骨髁临界性骨缺损动物模型制备及临界骨缺损值

单位：1. 徐州医科大学附属医院骨科 2. 苏州大学附属张家港医院

来源：中国组织工程研究,2020,24(20):3191-3195.

摘要：

背景: 兔股骨远端骨缺损模型被研究者们广泛用于骨缺损替代骨组织工程材料的测试,但对于兔股骨髁圆柱形骨缺损模型的大小文献报道不一,直径分布在5-9 mm,深度8-12 mm,目前尚无统一的标准。

目的: 建立兔股骨髁不同尺寸骨缺损模型,确定兔股骨髁临界性骨缺损尺寸。

方法: 6月龄雄性新西兰白兔18只,随机分为3组,每组各6只,分别建立骨缺损模型,骨缺损直径依次为5,6,7mm,深度均为10mm,双侧手术,共计12侧。分别于术后第1天及术后第4,8,12周行CT扫描及三维重建,CT-Hedberg评分评价骨缺损愈合情况;于术后12周处死新西兰白兔,取出股骨髁缺损样本,通过大体观察和苏木精-伊红染色分析缺损区愈合情况。实验方案经徐州医科大学实验动物道德伦理委员会批准。

结果与结论: (1)术后所有兔均存活,术后12周大体观察示:直径5 mm组缺损由新生骨组织充填,股骨髁塑形良好,骨缺损基本完全修复;直径6 mm组、直径7 mm组骨缺损区可见明显凹陷,新生骨组织较少,骨缺损未修复;(2)CT图像示:术后第4,8周,直径5 mm组缺损区逐渐减小,断端桥接;直径6 mm、直径7 mm组缺损区仅周边有少量新生骨长入,缺损面积较前稍减小;术后第12周可见直径5 mm组皮质骨结构完整、连续,骨缺损基本完全修复;直径6 mm组骨缺损部分修复;直径7 mm组缺损未修复,仍可见明显缺损空腔存在;(3)CT-Hedberg评分显示,术后各时间点直径6 mm组评分显著低于直径5 mm组(P < 0.05);与直径7 mm组比较差异无显著性意义(P > 0.05);(4)组织学结果示:术后12周直径5 mm组缺损区出现排列不规则的骨小梁结构,并可见大量新生骨组织填充,其他2组在骨缺损周边可见部分新生骨小梁存在,但缺损区新生骨组织填充较少;(5)结果说明,在12周的实验观察期内,在缺损深度同为10 mm的条件下,直径＞6 mm的股骨髁缺损未能自行愈合,而直径<6 mm的股骨髁缺损基本完全修复。此结果符合临界骨缺损的标准,故直径6 mm可作为兔股骨髁临界骨缺损值。

关键词：兔; 股骨髁; 临界性骨缺损; 缺损尺寸; 动物模型

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薄荷油叠加气候箱建立阳虚寒凝型膝痹模型兔

单位：1. 新疆医科大学附属中医医院 2. 新疆医科大学

来源：中国组织工程研究,2020,24(23):3696-3701.

摘要：

背景: 课题组前期用石膏铁丝固定法建立了兔膝骨性关节炎模型,但尚未建立膝骨性关节炎的中医证型的模型。

目的: 实验拟通过薄荷油叠加气候箱探索建立兔阳虚寒凝型膝痹模型的可行性,为以后的研究奠定基础。

方法: 将32只实验动物随机分为正常组、模型组、阳虚组、阳虚寒凝组,除正常组外均予石膏制动法固定兔膝关节8周;阳虚组在固定第7周开始每日上午予薄荷油灌胃2周;阳虚寒凝组每日置于4℃的气候箱1.5 h,在制动6周后叠加阳虚组操作。灌胃7,14 d后用ELISA检测血清中促甲状腺素T4变化;待膝痹造模达到8周后,取关节软骨、半月板、滑膜行组织学评分;同时观察动物行为学,采用红外线热成像仪检测体表温度变化。实验方案经新疆医科大学第一附属医院动物实验伦理委员会批准(批准号为IACUC-20170222026)。

结果与结论:①行为学中可观察到阳虚寒凝组出现相关阳虚寒凝证的症状;②阳虚寒凝组兔足部温度低于正常组和模型组(P < 0.05);③阳虚组和阳虚寒凝组血清T4值均低于正常组(P < 0.05);④膝关节Mankin评分:阳虚组、阳虚寒凝组均较正常组高(P < 0.05)较模型组低(P < 0.05);⑤半月板、滑膜苏木精-伊红显示,阳虚组、阳虚寒凝组与模型组比较,组间差异不明显;⑥从组织形态上,结合T4、红外线热成像仪、行为学观察结果,可以说明薄荷油叠加气候箱在一定程度上模拟了疾病状态,可以为阳虚寒凝型骨关节炎模型建立提供一定的参考。

关键词：膝痹; 膝骨性关节炎; 薄荷油; 阳虚寒凝

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富血小板血浆促进胫骨骨折模型兔的骨愈合

单位：新疆医科大学第一附属医院昌吉分院骨科

来源：中国组织工程研究,2020,24(35):5595-5599.

摘要：

背景: 骨折具有自我愈合周期长、延迟愈合等问题。生物组织具有自我修复的潜能,那么有没有办法将组织自身修复能力调动起来,为生物体自身修复所用呢?富血小板血浆技术正是解决这一难题的有效方式之一。

目的: 探讨自体富血小板血浆对兔胫骨骨折愈合的促进作用。

方法: 选取新西兰大白兔12只,随机分为富血小板血浆组及对照组,每组6只。所有动物均在右侧胫骨远端2 cm处用摆锯造成横行骨折,克氏针髓内固定。富血小板血浆组将制备的富血小板血浆凝胶注射至骨折断处,对照组相同方法将等量无菌生理盐水注射至骨折断端。术前及术后2,4,8周留取血液标本,测定骨钙素、骨碱性磷酸酶水平;术后2,4,8周分别处死2只,观察骨折标本的骨折修复情况,计算骨痂体积。

结果与结论: (1)术后各时点,富血小板血浆组骨痂直径均大于对照组(P < 0.05);(2)术后第4周,富血小板血浆组骨痂体积明显大于对照组(P < 0.05);术后第8周时,富血小板血浆组骨痂体积大于对照组,但差异无显著性意义(P > 0.05);(3)术后第4周富血小板血浆组骨小梁平均宽度、骨小梁面积比及血管数目均优于对照组(P < 0.05);术后第8周2组数据差异无显著性意义(P > 0.05);(4)2组血清中骨钙素水平在术后第4周时达到最高,可维持高浓度一段时间,富血小板血浆组最高值大于对照组(P < 0.05);(5)富血小板血浆组中血清碱性磷酸酶水平始终高于对照组,说明富血小板血浆在骨折愈合过程中对碱性磷酸酶的影响始终存在;(6)提示富血小板血浆技术对骨折愈合有一定的促进作用,可为骨科临床骨折不愈合或延迟愈合的治疗提供新思路、新方法。

关键词：骨; 骨折; 富血小板血浆; 兔; 动物; 内固定; 骨痂

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