岛津CL8000全自动生化分析仪酸碱清洗剂研制与应用

Posted 2023-01-13 乙烯

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岛津CL8000生化分析仪上清洗反应杯的酸、碱清洗剂是每日运行的必需品，该清洗剂用量多，价格昂贵(约2000元/L)，国内无代替品。鉴于此，本科根据原装瓶上提供的成分(碱清洗剂：PH11.9，非离子表面活性剂；酸清洗剂：PH2.5，有机酸类，非离子表面活性剂)，参考有关文献[1，2]，筛选有机酸，强碱以及在有机酸、强碱的溶液中有较好渗透、乳化、分散和洗涤性能的非离子表面活性剂，配制了五色透明、化学性质稳定、价格低廉的酸、碱清洗剂。经二年多的试用，已达到实验要求，可以代替原装试剂对反应杯的清洗。
1 材料和方法
1.1 仪器岛津CL8000全自动生化分析仪(日本株式会社)。刻度天平、pH计(上海雷磁仪器厂)、4号滤球。
1.2 主要材料三羧甲基氨基甲烷(Tris)、壬基酚聚氧乙烯醚(10Eo)、聚氧乙烯壬基酚醚(10Eo)、聚氧乙烯壬基酚醚(10Eo)、草酸、乙酸、甲酸、蒸馏水、原装酸清洗液、原装碱清洗液、质控液(批号：EM2 0312)。
1.3 配制方法
1.3.1 酸清洗剂配制0.5mol/L的草酸溶液，根据所需实际量用蒸馏水稀释至0.03mol/L，稀释后的酸中添加壬基酚聚氧乙烯醚使之含量为1.0%。使用PH计，用浓液调至PH11.9，用4号滤球过滤后备用。
1.3.2 碱清洗剂配制1.0mol/L的三羧甲基氨基甲烷浓液，根据所需的实际量用蒸馏水稀释至0.12mol/L，稀释后的碱中添加壬基酚聚氧乙烯醚使之含量为1.0%，使用PH计，用浓液调至PH2.5。用4号滤球过滤后备用。
1.4 检测方法每隔四个月检测一次贮存的酸、碱清洗剂外观和PH值。用原装和研制的酸、碱清洗剂在连续五个工作日内交替做水空白试验40次，记录清洗后1号杯不同波长下的毫吸光度(mAbs)，求均值和变异系数。用研制的清洗剂做洗液，选用不同方法学、不同(短、中、长)波长、反应试剂难清洗、样本用量多的项目Alb、Glu、Cr和ALT测质控液20次，求均值和变异系数。
2 结果
2.1 理化稳定指标对比酸、碱清洗剂理化稳定指标见表1。
2.2 清洗效果对比用原装和研制的酸、碱清洗剂在连续五个工作日内交替做水空白试验40次，记录清洗后l号杯不同波长下的毫吸光度(mAbs)，经统计学处理，结果见表2。
2.3 精密度和准确度试验用研制的清洗剂做洗液检测Alb、Glu、Cr和ALT的质控液20次，结果见表3。
3 讨论
3.1 非离子表面活性剂品种众多，根据要在强酸、强碱的条件下稳定及具有良好的渗透、乳化、分散和洗涤性能，我们筛选出壬基酚聚氧乙烯醚(10Eo)、聚氧乙烯壬基酚醚(7Eo)、聚氧乙烯壬基酚醚(4Eo)，分别配成含上述物质0.5%、1.0%、1.5%、2.0%的酸、碱洗液，通过对比得出：壬基酚聚氧乙烯醚(10Eo)效果最好，含1.5%完全达到实验要求，过多的非离子表面活性剂会加大清除难度。壬基酚聚氧乙烯醚(10Eo)的性能：有较好的渗透、乳化、分散和洗涤性能，呈容易使用液体状态，对硫酸、盐酸、有机酸、一般还原剂、氧化剂及硬水稳定，对碱稳定。
3.2 岛津CL8000反应杯为立式恒温水浴，以石英砂(SiO2)做材料。故对碱的筛选首先考虑对石英杯的氧化，其次为稳定性。因无机强碱对石英氧化太强，弱碱效果不理想，最后选择三羧甲基氨基甲烷(Tris)，它是一种一价有机碱，溶解度高，不潮解，配制、称量容易，与强酸中和反应完全，水溶液在空气中不吸收CO2，暴露在空气中时PH值也不改变，低浓度的溶液能够长期稳定。
3.3 原装酸清洗剂的酸为有机酸类。有机酸类有：羧酸(RCOOH)、磺酸RSO2OH)、亚磺酸(RSOOH)、硫羧酸(RCOSH)等，通常只指羧酸。本研究选用乙酸、草酸、甲酸做对比实验，得出化学性质稳定，常做基准物的有机强酸一草酸效果最好。草酸也常用于金属和大理石(主要成分SiO2)的清洗及纺织品的漂白。
3.4 由于灯泡的老化，试剂杯水空白毫吸光度由负到正，逐步增高。为了减少这种漂移，本实验采取了短时间(五个工作日)内交替使用原装和研制的清洗剂测水空白。对于因检测用空气和纯净水做介质时相减得到的负毫吸光度(-mAbs)数值，其变异系数CV的计算用CV=S/| X|×100%处理。
3.5 做精密度和准确度试验所选择的检测项目，我们考虑了不同方法学：连续监测法(ALT)、速率法(Cr)、终点法(Alb)、酶法(Glu)，不同(短、中、长)波长：ALT(340nm)、Glu(505nm)、Alb(630nm)，难清洗的反应试剂：测Cr的苦味酸，样本用量多的ALT、Cr。其测定值的均值在一个标准差内，CV满足要求。说明研制的清洗剂对反应杯清洗干净，对不同方法学，不同波长的试验无影响。
3.6 考虑到配制的洗液是用有机强碱、有机强酸，故没有添加防腐剂，也没有做细菌培养；岛津CL8000洗杯时的感应为电容式的，因而也没有添加无机介质。
3.7 该酸、碱清洗剂也适用其它石英比色杯的清洁。用此酸、碱清洗剂稀释10倍，先碱后酸浸泡12小时，再用棉签轻轻擦洗，石英杯将光洁如新。操作时，戴手套为宜。