聚丙烯酰胺凝胶的快速考马斯蓝染色和脱色方法
Posted 马斯
篇首语：从某种意义来看，世间一切都是遇见，就像冷遇见暖，就有了雨；春遇见冬，就有了岁月；天遇见地，有了永恒；人遇见人，有了生命。本文由小常识网(cha138.com)小编为大家整理，主要介绍了聚丙烯酰胺凝胶的快速考马斯蓝染色和脱色方法相关的知识，希望对你有一定的参考价值。
中图分类号：R446 文献标识码：B 文章编号：1671-7414(2004)03-055-01 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质是一项常用的分析技术，它常以考马斯蓝、甲醇和乙酸作为染色和脱色剂，传统的染色和脱色时间分别为3～6h和10～48h。本文介绍一种快速的高温染色和漂洗脱色的方法，该法简便、快速、经济、有效。染色和脱色时间均可缩短至0.5～1.0h。具体方法：蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，将凝胶放于含有100～250ml染色液(1.25mg/L考马斯蓝)甲醇∶乙酸∶水(50∶10∶40)溶液的塑料盒中染色，盖紧盒盖后，置55℃水浴30min，不时用手摇动。
染色完毕后，将凝胶用蒸馏水短暂冲洗，然后放于200～300ml2.5%(v/v)的漂白液(5.25g/dl次氯酸钠)中，在摇床中以60r/min的速度于室温脱色30～60min。脱色时应不时观察脱色情况，当可见大多数蛋白带时应立即倒掉漂白液，凝胶用自来水彻底冲洗后，再用500ml自来水漂洗3次，每次10min，新方法与传统方法相比，两者灵敏度相当，但新方法本底更为清晰。
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种子的贮藏蛋白是种子形成过程中基因表达的产物，是影响种子品质的因素。利用电泳技术分析蔬菜种子的贮藏蛋白以鉴定品种资源已有报道〔1〕。本试验利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术，对当前生产上大面积栽培
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