高效液相色谱法测定病毒消口服液中绿原酸的含量

Posted 2022-11-26 溶液

篇首语：得意犹堪夸世俗，诏黄新湿字如鸦。本文由小常识网(cha138.com)小编为大家整理，主要介绍了高效液相色谱法测定病毒消口服液中绿原酸的含量相关的知识，希望对你有一定的参考价值。

【摘要】目的建立病毒消口服液中绿原酸含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Hypersil ODS C18(5μm，4.6mm×100mm)，流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(13∶87)，检测波长为327nm；柱温为25℃；流速为1.01ml/min。结果绿原酸在112～1120ng(r=0.99998，n=6)范围内呈良好的线性关系；平均回收率为99.08%，RSD为0.57%。结论本方法简便、快速，测定结果准确，重现性好。

　　【关键词】病毒消口服液；绿原酸；高效液相色谱法；含量

　　Determination of the contents of chloralgenic acid in Bingduxiao Koufuye by HPLC

DEN Ze-yi.The Linli

People’s Hospital of Hunan Province，Linli Hunan 415200，China

【Abstract】 Objective To establish a HPLC method for determining the contents of chloralgenic acid in Bingduxiao Koufuye.Methods Stationary phase was Hypersil ODS C18(4.6min×100mm；5μm)，mobile phase was acetonitrile-0.4% H3PO4 triethylamine(13：87)，election wavelength 327nm，flow rate 1.0ml/min and coulumn temperature 25℃.Results There was good linearity in range of 112～1120ng(r=0.99998，n=6) for chloralgenic acid.The average recovery of chloralgenic acid was 99.08%；RSD was 0.57%.Conclusion This method is simple，fast and accurate.

【Key words】 Bingduxiao Koufuye；chloralgenic acid；HPLC；content

病毒消口服液为我院内科传统制剂，具有清热解毒，祛湿，凉血作用，用于治疗上呼吸道感染、腮腺炎、风热感冒，瘟热等病毒性疾患。该制剂由银花、板蓝根、连翘、重楼等组成。为更好地控制该制剂质量，保证用药安全有效，笔者进行了定量研究，采用高效液相色谱法测定方中绿原酸的含量，现报告如下。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪：Agilent 1100系列四元梯度泵、Agilent 1100 手动进样器、Agilent 1100系列二极管阵列检测器、Agilent 1100工作站(Agilent 公司)；超声波清洗器(昆山市淀山湖检测仪器厂)。乙腈(色谱纯，上海陆都化学试剂厂，20040125)，其余所用试剂均为分析纯。绿原酸(中国药品生物制品检定所，753-2002210)；病毒消口服液(本院自制，20040911、20041112、20041217)。

2 绿原酸的含量测定

2.1 色谱条件

色谱柱：Hypersil ODS C18 5μm Φ4.6mm×100mm；流动相：流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(13∶87)，检测波长为327nm；柱温为25℃；流速为1.0ml/min。理论塔板数以绿原酸计不低于2000。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取绿原酸对照品14.00mg，置25ml棕色量瓶中，加50%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置10ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.3 线性范围的考察

精密吸取上述对照品溶液2、4、6、8、10、20μl，按上述色谱条件测定峰面积，以对照品峰面积为纵坐标，以对照品的量为横坐标进行线性回归，结果表明绿原酸在112～1120ng范围内呈线性关系。Y=2.2849X+7.2836，r=0.99998(见图1)。

2.4 供试品溶液的制备

精密量取病毒消口服液5ml，置蒸发皿中，水浴蒸干，残渣再加甲醇溶解，并定容于10ml量瓶中，作为供试品溶液。

2.5 空白试验

取去银花、蒲公英的阴性制剂，按2.4项下方法制得阴性对照液，以上述色谱条件测定。结果阴性对照液与绿原酸相同保留时间处，无色谱峰出现。色谱图见图1。

2.6 精密度试验

取同一浓度的绿原酸对照品溶液，在上述色谱条件下测定，重复进样5次，测定结果RSD为1.76%(n=5)。结果表明进样精密度良好。

2.7 稳定性试验

取供试品溶液，分别于配制0、1、2、4、8、24h依法测定，结果RSD为0.63%(n=5)。

2.8 重复性试验

取批号010531的样品5份，分别按2.4项下方法制得供试液，测定绿原酸平均含量为0.81mg/片，RSD为1.81%(n=5)，结果表明样品测定重现性良好。

2.9 加样回收试验

精密量取已知含量的010531供试品3.0ml，置10ml量瓶中，各精密加入一定浓度的对照品溶液(取绿原酸8.16mg，置10ml量瓶中，加50%甲醇溶解并定容至10ml，摇匀，即得)1ml，分别按2.4项下方法制得供试液，以上述色谱条件测定绿原酸含量，绿原酸平均回收率为99.08%，RSD为0.57%。结果见表1。表1 绿原酸的回收率试验结果 (略)

2.10 样品的测定

精密量取20040911、20041112、20041217的病毒消口服液样品，按2.4项下方法制得供试液，测定结果见表2。色谱图见图1。表2 病毒消口服液中绿原酸测定结果 (略)

3 讨论

在测定制剂中绿原酸含量时，曾参阅文献方法［1，2］对流动相进行了选择，结果以乙腈-0.4%磷酸溶液(13：87)分离效果较好。

采用高效液相色谱法直接测定病毒消口服液中绿原酸的含量，绿原酸峰形对称，分离完全，图谱简单，方法简便、快速，准确度高，重现性好，可作为该制剂的质控方法。

【参考文献】

1 王喜军.高效液相色谱在中药研究中的应用.哈尔滨：黑龙江科学技术出版社，1996，26.

2 王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究.北京：中国医药科技出版社，1994，260.