烧伤0号抗感染动物实验研究

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篇首语:亦余心之所善兮,虽九死其犹未悔。本文由小常识网(cha138.com)小编为大家整理,主要介绍了烧伤0号抗感染动物实验研究相关的知识,希望对你有一定的参考价值。

通过实验研究,对水溶性胶冻剂烧伤0号的抑菌效果做出确切评价。将小鼠制备成感染金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌3种动物模型,用烧伤0号喷敷于创面,观察抑菌效果,同时与天津达仁堂制药二厂生产的京万红软膏进行比较。实验显示烧伤0号对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌有较强的抑制作用,对大肠杆菌的抑菌稍差。但抑菌效果均明显优于京万红软膏。

1 实验材料

1.1 主要药物

(1)水溶性胶冻剂烧伤0号,河北省中西医结合烧伤治疗中心研制。(2)京万红软膏采用天津达仁堂达二药业有限公司(原天津达仁堂制药二厂)生产、批号为Z12020440,购于石家庄乐仁堂股份有限公司。

1.2 标准菌株

均为河北医科大学附属二院生化室提供。(1)绿脓杆菌ATCC 27853;(2)金黄色葡萄球菌ATCC 25923;(3)大肠杆菌ATCC 259221。

1.3 实验动物

昆明种清洁级KM小鼠,体重20~22g,雌雄兼用(均由河北省实验动物中心提供,合格证编号:DK0504-0029)。

2 实验方法与结果

2.1 小鼠深Ⅱ度烧伤感染模型制备

取昆明种清洁级KM健康小鼠40只,体重20~22g,雌雄不拘(均由河北医科大学实验动物学部提供)。随机分为阳性对照组(用京万红软膏换药)和实验组(水溶性胶冻剂烧伤0号)各20只。控制实验室温度为(20±0.5)℃,湿度为(55±0.5)%,换气次数为15次/h,自然光照明的条件下,前一天将动物放入玻璃麻醉箱内,把装有浸润乙醚棉球的小烧杯放入麻醉箱,然后观察小鼠,由兴奋转为抑制,呼吸变慢时,四肢紧张度明显减低,皮肤痛觉消失,分别取出玻璃麻醉箱,将其被毛剪短,然后用棉球蘸取脱毛剂硫化钠液(硫化钠8g溶于100ml水中),在所需部位涂一薄层,2~3min后用温水洗去脱落的被毛,用纱布擦干。当天采用同样的麻醉方法,仍在乙醚轻麻下用上海医用仪表厂生产的WMZK-01型圆型电烙器,选择圆型电烙头半径为1.5cm,调温至70℃,小鼠的腹部垫一块纱布,以保持小鼠的背部平坦,将圆型电烙头移至背部,直接接触已脱毛的皮肤20s,制成深Ⅱ度烧伤模型(在光镜下,创面组织的石蜡切片经HE染色后均显示深Ⅱ度烧伤的病理学改变)。伤后立即腹腔内注射生理盐水6ml以抗休克。

2.2 实验方法

在复制深Ⅱ度烧伤动物模型过程中因烧伤休克,阳性对照组死亡1只,成活19只;试验组无一例死亡。分别于烧伤后第3天切痂,创面接种1ml的绿脓杆菌标准菌株的菌液(9×108 个/ml),用生理盐水纱布缝盖创面。然后用敷料绷带包扎。每天换药1次,缝盖纱布不更换,在其下滴绿脓杆菌标准菌株的菌液1ml。于接种后第3天拆除缝盖纱布,取创面分泌物送细菌培养,分别用水溶性胶冻剂烧伤0号、京万红软膏每天换药1次,换药前取创面分泌物送培养,直到3次培养阴性为止。实验结果见表1。表1 两种药物抗绿脓杆菌感染转阴时间比较 (略)注:*P<0.05
  
  其他两种菌株(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌)实验方法同此法,在复制深Ⅱ度烧伤动物模型时,金黄色葡萄球菌阳性对照组死亡1例,试验组死亡1例;大肠杆菌阳性对照组、试验组均无一例死亡。试验结果见表2、表3。表2 两种药物抗金黄色葡萄球菌感染转阴时间比较 (略)注:*P<0.05表3 两种药物抗大肠杆菌感染转阴时间比较 (略) 注:*P<0.05
 
  该实验完毕后,采用断头法(用剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉,鼠立即死亡),将小鼠处死。

3 讨论
  
  从表1可以看出,用水溶性胶冻剂烧伤0号治疗绿脓杆菌小鼠模型9天转阴率(%)为80%,11天转阴率为100%,对照组9天转阴率为26.31%,11天转阴率为57.89%;从表2可以看出,用水溶性胶冻剂烧伤0号治疗金黄色葡萄球菌小鼠模型9天转阴率为73.68%,11天转阴率为100%,对照组9天转阴率为36.84%,11天转阴率为73.68%;从表3可以看出,用水溶性胶冻剂烧伤0号治疗大肠杆菌小鼠模型9天转阴率为30%,11天转阴率为75%,对照组9天转阴率为20%,11天转阴率为50%。经统计学处理,实验组与对照组之间差异均有显著性(P<0.05)。

水溶性胶冻剂烧伤0号对临床常见的三种菌株的抑菌效果均优于京万红软膏。两种药物对大肠杆菌小鼠模型的抑菌效果均低于另外两种菌株。但烧伤0号对其他菌株是否优于京万红膏,烧伤0号是否会有细菌的耐药性等一系列问题还需要进一步研究探讨。

基金项目:河北省中医药管理局2005年立项课题(编号:05106)

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