裂殖酵母的MPF的化学本质是什么?是如何发现的?

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裂殖酵母油MPF是一种复合物,由Cdc2和Cdc13两种蛋白组成,其中Cdc2是一种蛋白激酶,Cdc13是周期蛋白。主要是通过对裂殖酵母温度敏感突变的研究发现了编码这两种蛋白的基因。裂殖酵母中几个温度敏感的cdc基因的隐性突变使得裂殖酵母在周期中不能进入M期,由于生长没有停止,所以比正常的酵母长很多。这些基因中的一个显性突变,命名为cdc2,使得酵母出现wee表型(小而不分裂)。一般来说,隐形表型是因为缺少野生型的功能蛋白所致,而显性表型是因为增加了一些蛋白功能,导致调节失常。

  对分离的突变体的研究发现,没有Cdc2的活性,细胞不能进入有丝分裂。这表明Cdc2是裂殖酵母进入有丝分裂的一个关键调节因子。通过基因工程克隆到cdc2-基因,序列分析表明该基因编码一个分子量为34kDa的蛋白,与真核生物的蛋白激酶同源,该蛋白又称为p34cdc2蛋白。后来从裂殖酵母中分离了另一个cdc基因,命名为cdc13+,该基因的产物也是裂殖酵母进入有丝分裂必需的;序列分析表明该基因编码的蛋白质与非洲爪蟾和海胆的周期蛋白B同源。进一步研究发现Cdc13和Cdc2蛋白能够形成异质二聚体,并且具有蛋白激酶的活性。另外还发现这种蛋白激酶的活性随裂殖酵母的周期变化而变化,Cdc13的浓度也随Cdc2的活性波动而波动。这些结构表明,裂殖酵母的Cdc2-Cdc13相当于非洲爪蟾的MPF。

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